• eRNA(enhancer-derived RNA)是一类被定义为转录于基因组上增强子(enhancer)区域的RNA。早期研究发现基因组上基因外(extragenic)及基因间区(intergenic)的DNA也可以转录出RNA,其中部分转录本转录于推定的具有活性的增强子区域。多数源于增强子的RNA丰度很低,一些活性增强子在细胞中平均产生1.3个转录本。eRNA相当短,长度在500bp到5kb之间,属于lncRNA,且多数情况下是双向转录的。

    早期研究认为增强子转录的RNA(eRNA)是由enhancer折叠到靶基因promoter附近时,招募的RNA聚合酶II结合产生的噪音,作为一种转录调控的副产物,因此eRNA的定义与功能尚不明确,是目前新兴的研究对象之一。

    eRNA-seq

  • 对于RNA-Seq数据,首先利用fastqc软件对原始数据进行质量评估;再使用STAR软件将原始数据比对到参考基因组;然后用cuffdiff软件分别对每例样本进行表达量计算,并对基因进行注释,差异基因分析(比较不同组之间的差别)。

     

    随后通过R包(如DEseq2,edgeR等),对差异基因数据进行进一步分析,并对靶基因进行GO和KEGG富集分析。

    分析流程

    构建eRNA-seq文库,主要分为以下几步:

    1、提取总RNA

    2、反转录成cDNA

    3、磁珠纯化cDNA

    4、末端补平

    5、连接测序接头

    6、PCR扩增

    7、磁珠纯化DNA

    8、上机测序

    文库构建

  • 2019年10月,《Nature Communications》刊发了德克萨斯大学休斯敦健康研究中心的韩冷、李文博课题组合作的研究成果。该研究构建了迄今为止最完整的癌症增强子RNA(eRNA)图谱,并揭示了eRNA在癌症临床中的潜在应用。

     

     

    该项研究通过在约1万名癌症病人及约1000个癌症细胞系中检测eRNA的表达用于构建癌症eRNA图谱,揭示了eRNA的癌症特异性表达/癌症种系特异性表达的特征,同时强调了eRNA作为生物标记物在不同类型癌症临床上的应用。

    通过研究eRNA与转录因子之间的共表达关系,发现eRNA的特异性表达与转录因子特异性调控密切相关。分析eRNA与编码基因之间的基因组距离及表达相关性并结合多组Hi-C数据加以佐证,该研究构建了eRNA的调控网络,揭示了eRNA在调控致癌信号通路及调节癌症临床治疗基因中的关键作用。此外,该研究通过调查eRNA与抗癌化合物之间的关系,首次证实eRNA可影响癌症细胞对抗癌药物的敏感性和抵抗性,且该影响可能会关联到相关的一条或多条癌症信号通路。这项研究拓展了该领域对癌症基因转录调控的认知,探索了基于靶向eRNA的癌症治疗及联合治疗方案,开拓了癌症治疗新思路。

  • RNA样品

    Total RNA: ≥10ug

     

     

     

    细胞或组织

     

    细胞量 ≥40million

     

    动物组织量 ≥1g,植物组织量 ≥3g

     

    建议样品制备 2~3 份,具体细节详询销售。